ការវិភាគហ្វ្លុយអូរ៉េម៉ែត្រដោយមាននិរន្តរភាព និងអាចទុកចិត្តបានដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ Recombinant Factor C
លេខកាតាឡុក
លេខកាតាឡុក | ការពិពណ៌នា | ភាពរសើប EU/ml |
RFC100TA | សំណុំឧបករណ៍វិភាគអង់ដូតូស៊ីន BETMAT™ rFC (វិធីសាស្ត្រហ្វ្លុយអូរីម៉ែត្រិចកត្តាផ្សំឡើងវិញ C), ការធ្វើតេស្តចំនួន 100/សំណុំ | ០.០១-១០ សហភាពអឺរ៉ុប/មីលីលីត្រ |
RFC100TB | ០,០០៥-៥EU/មីលីលីត្រ |
លក្ខណៈពិសេសនៃផលិតផល ការរកឃើញអង់ដូតូស៊ីនបាក់តេរី (BET) ដោយផ្អែកលើកត្តាផ្សំឡើងវិញ C (rFC)
និរន្តរភាពខ្លាំង៖
តាមរយៈការលុបបំបាត់ការប្រើប្រាស់ឈាមក្តាមសេះសម្រាប់ការទាញយក lysate សារធាតុ Factor C ដែលបានបង្កើតឡើងវិញត្រូវបានវិស្វកម្មហ្សែនដើម្បីការពារប្រភេទសត្វជិតផុតពូជ និងការពារការនេសាទហួសកម្រិត។ វិធីសាស្រ្តប្រកបដោយនិរន្តរភាពនេះស្របតាមគំនិតផ្តួចផ្តើមអភិរក្សបរិស្ថាន និងធនធានជីវសាស្ត្រសកល ដោយគាំទ្រដល់ការអនុវត្តផលិតកម្មបៃតង និងអនុលោមតាមច្បាប់។
ភាពជឿជាក់ខ្ពស់នៃការរកឃើញ៖
ដោយមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ rFC មានប្រតិកម្មទាំងស្រុងជាមួយនឹងសារធាតុ endotoxins របស់បាក់តេរី ហើយមិនត្រូវបានប៉ះពាល់ដោយភាពមិនបរិសុទ្ធដូចជា β-glucan ទេ ដោយកាត់បន្ថយលទ្ធផលវិជ្ជមានមិនពិត និងអវិជ្ជមានមិនពិត។ ការវិភាគនេះសម្រេចបាននូវភាពរសើបរហូតដល់ 0.005 EU/mL និងផ្តល់នូវជួររកឃើញលីនេអ៊ែរយ៉ាងទូលំទូលាយ។ សមត្ថភាពធ្វើម្តងទៀត និងភាពត្រឹមត្រូវរបស់វាអនុលោមតាមស្តង់ដារឱសថសាស្ត្រអន្តរជាតិ (USP, Eur.P) ដែលធានាបាននូវលទ្ធផលដែលមានស្ថេរភាព ស្របគ្នា និងអាចតាមដានបាន។
ការអនុវត្តយ៉ាងទូលំទូលាយ និងភាពងាយស្រួល៖
ឆបគ្នាជាមួយប្រភេទសំណាកផ្សេងៗ រួមទាំងវ៉ាក់សាំង អង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់ និងសារធាតុចម្រាញ់ចេញពីឧបករណ៍វេជ្ជសាស្ត្រ ការវិភាគ rFC ផ្តល់នូវលំហូរការងារសាមញ្ញដែលសមរម្យសម្រាប់ប្រព័ន្ធធ្វើតេស្តដោយស្វ័យប្រវត្តិ និងការវិភាគដែលមានអត្រាទិន្នផលខ្ពស់។ វដ្តធ្វើតេស្តធម្មតាគឺ 1-2 ម៉ោង ដែលធ្វើអោយប្រសើរឡើងយ៉ាងខ្លាំងនូវប្រសិទ្ធភាពមន្ទីរពិសោធន៍។
សុវត្ថិភាព និងស្ថេរភាពខ្ពស់៖
ដោយមិនមានផ្ទុកសមាសធាតុដែលមានប្រភពមកពីសត្វ សារធាតុប្រតិកម្មនេះលុបបំបាត់ហានិភ័យនៃការចម្លងរោគដែលទាក់ទងនឹងសារធាតុប្រតិកម្ម LAL បែបប្រពៃណី។ វាបង្ហាញពីការប្រែប្រួលតិចតួចបំផុតពីមួយបាច់ទៅមួយបាច់ លក្ខខណ្ឌផ្ទុកដែលអាចបត់បែនបាន និងអាយុកាលធ្នើវែង ដែលកាត់បន្ថយថ្លៃដើមប្រតិបត្តិការ និងកាកសំណល់សម្ភារៈ។
ការអនុវត្តសារធាតុសាកល្បងអង់ដូតូស៊ីនកត្តាផ្សំឡើងវិញ C (rFC)
កត្តាផ្សំឡើងវិញ C (rFC) បច្ចេកវិទ្យារកឃើញអង់ដូតូស៊ីន គឺជាជម្រើសប្រកបដោយនិរន្តរភាព និងវិស្វកម្មហ្សែនជំនួសឲ្យការធ្វើតេស្ត Limulus Amebocyte Lysate (LAL) បែបប្រពៃណី។ វាទទួលស្គាល់ជាពិសេសនូវអង់ដូតូស៊ីន lipopolysaccharide (LPS) របស់បាក់តេរីក្រាមអវិជ្ជមាន ដែលមានភាពរសើបខ្ពស់ និងភាពធន់នឹងការជ្រៀតជ្រែក។ វាត្រូវបានគេប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងឱសថ ឧបករណ៍វេជ្ជសាស្ត្រ ជីវសាស្ត្រ ការធ្វើតេស្តមន្ទីរពិសោធន៍ និងការត្រួតពិនិត្យបរិស្ថាន។ នៅក្នុងឧស្សាហកម្មឱសថ rFC ត្រូវបានប្រើដើម្បីគ្រប់គ្រងអង់ដូទីននៅក្នុងវត្ថុធាតុដើម សារធាតុចាក់ និងជីវឱសថ ដើម្បីធានាសុវត្ថិភាពថ្នាំ។ នៅក្នុងវិស័យឧបករណ៍វេជ្ជសាស្ត្រ វាអាចរកឃើញអង់ដូទីនដាននៅលើផ្ទៃនៃផលិតផលដែលអាចចោលបាន និងផលិតផលដែលអាចផ្សាំបាន ឬនៅក្នុងទឹកលាងសម្អាត។ នៅក្នុងការព្យាបាលកម្រិតខ្ពស់ដូចជាវ៉ាក់សាំង និងការព្យាបាលដោយកោសិកា និងហ្សែន rFC អាចវាស់អង់ដូទីនបានយ៉ាងត្រឹមត្រូវនៅក្នុងគំរូស្មុគស្មាញ ដែលបំពេញតាមតម្រូវការឱសថសាស្ត្រសកល។ វាក៏ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការធ្វើតេស្តប្រព័ន្ធវប្បធម៌កោសិកា សម្ភារៈប្រើប្រាស់ក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ ទឹកឱសថ និងគំរូបរិស្ថានផងដែរ។ ការវិភាគ rFC មិនត្រឹមតែមានភាពជាក់លាក់ និងមានប្រសិទ្ធភាពប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាក៏ស្របនឹងគោលគំនិតនៃការអភិវឌ្ឍប្រកបដោយនិរន្តរភាពផងដែរ ហើយកំពុងក្លាយជាស្តង់ដារអន្តរជាតិថ្មីបន្តិចម្តងៗសម្រាប់ការធ្វើតេស្តអង់ដូទីន។
ព័ត៌មានបច្ចេកទេសស្តីពីការវិភាគហ្វ្លុយអូរ៉ូម៉ែត្រិចកត្តាផ្សំឡើងវិញ C (rFC) សម្រាប់ការរកឃើញអង់ដូតូស៊ីនបាក់តេរី
ការវិភាគហ្វ្លុយអូរីម៉ែត្រ rFC គឺជាវិធីសាស្ត្រក្នុងវីត្រូ ដែលគ្មានក្តាមសេះ សម្រាប់ការរកឃើញសារធាតុ endotoxin បាក់តេរីបរិមាណ (lipopolysaccharide, LPS) ដែលអនុលោមតាមឱសថស្ថានសកល (USP , EP 2.6.14)។ គោលការណ៍ស្នូលរបស់វាពឹងផ្អែកលើ recombinant Factor C (rFC)—ប្រូតេអ៊ីន recombinant ដែលត្រូវបានរចនាឡើងពីដែនភ្ជាប់ LPS នៃ horseshoe crab Factor C—លុបបំបាត់ការពឹងផ្អែកលើឈាមក្តាមសេះធម្មជាតិ និងដោះស្រាយបញ្ហានិរន្តរភាព។
១. គោលការណ៍នៃការវិភាគ
អង់ដូតុកស៊ីន LPS ភ្ជាប់ជាពិសេសទៅនឹងដែនទទួលស្គាល់ LPS នៃ rFC ដែលបង្កឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធដែលធ្វើឱ្យសកម្មភាពប្រូតេអាសសេរីនរបស់ rFC សកម្ម។ អាំងតង់ស៊ីតេនៃការបញ្ចេញពន្លឺ AMC គឺសមាមាត្រដោយផ្ទាល់ទៅនឹងកំហាប់អង់ដូតុកស៊ីននៅក្នុងគំរូ ដែលអាចវាស់វែងបានតាមរយៈឧបករណ៍អានមីក្រូផ្លាតបញ្ចេញពន្លឺ។
2. ប៉ារ៉ាម៉ែត្របច្ចេកទេសសំខាន់ៗ
ភាពរសើប៖ រកឃើញសារធាតុអង់ដូតូស៊ីននៅកំហាប់ទាបរហូតដល់ 0.005 EU/mL ដែលត្រូវគ្នា ឬលើសពីការវិភាគ Limulus Amebocyte Lysate (LAL) បែបប្រពៃណី។
ជួរលីនេអ៊ែរ៖ ជាធម្មតាគ្របដណ្តប់ 0.005–50 EU/mL ដែលអាចឱ្យមានការវិភាគបរិមាណនៅទូទាំងវិសាលគមកំហាប់ដ៏ធំទូលាយ។
ភាពជាក់លាក់៖ បង្ហាញពីភាពជាក់លាក់ខ្ពស់សម្រាប់ LPS; វាមិនត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មដោយ (1→3)-β-D-glucans (ការជ្រៀតជ្រែកទូទៅនៅក្នុងការវិភាគកំណកឈាមជែល LAL) ដែលកាត់បន្ថយលទ្ធផលវិជ្ជមានមិនពិត។
លក្ខខណ្ឌនៃការភ្ញាស់៖ តម្រូវឱ្យមានសីតុណ្ហភាពដែលបានគ្រប់គ្រង (37±1°C) និងពេលវេលាភ្ញាស់ (60–120 នាទី) ដោយវាស់ស្ទង់ពន្លឺហ្វ្លុយអូរីសង់នៅរលកពន្លឺរំញោច/បញ្ចេញពន្លឺ ~360 nm/~460 nm។
៣. ទិដ្ឋភាពទូទៅនៃលំហូរការងារ
រៀបចំសំណាក (ឧទាហរណ៍ ឱសថ ឧបករណ៍វេជ្ជសាស្ត្រ ផលិតផលជីវសាស្រ្ត) តាមរយៈការពនលាយ ឬការស្រង់ចេញ ដើម្បីលុបបំបាត់ការជ្រៀតជ្រែកម៉ាទ្រីស។
លាយសារធាតុ rFC ស្រទាប់ខាងក្រោមហ្វ្លុយអូរ៉ូហ្សេនិច និងសំណាកក្នុងអណ្តូងមីក្រូផ្លាត។
ភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 37°C ដើម្បីអនុញ្ញាតឱ្យមានការភ្ជាប់ LPS-rFC ការធ្វើឱ្យសកម្ម និងការកាត់ស្រទាប់ខាងក្រោម។
វាស់អាំងតង់ស៊ីតេនៃការបញ្ចេញពន្លឺ; គណនាកំហាប់អង់ដូតូស៊ីនដោយប្រើខ្សែកោងស្តង់ដារដែលបង្កើតឡើងដោយស្តង់ដារអង់ដូតូស៊ីនដែលគេស្គាល់ (ឧទាហរណ៍ Escherichia coli O55:B5 LPS)។
ការវិភាគនេះរួមបញ្ចូលគ្នានូវនិរន្តរភាព (គ្មានការប្រមូលផលក្តាមសេះ) ភាពជឿជាក់ (ការជ្រៀតជ្រែកទាប សមត្ថភាពផលិតឡើងវិញខ្ពស់) និងប្រសិទ្ធភាព ដែលធ្វើឱ្យវាល្អសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងគុណភាពនៅក្នុងឧស្សាហកម្មឱសថ និងជីវបច្ចេកវិទ្យា។